
В 1986-1988 годах служил в Вооруженных Силах СССР. В 1993 году закончил Тюменский государственный университет по специальности «правоведение».
С 27 июня 1993 года начал трудовую деятельность как юрисконсульт Ямало-Ненецкого филиала Западно-Сибирского коммерческого банка. С 25 июля 1994 года — исполняющий обязанности директора Ямало-Ненецкого филиала Западно-Сибирского коммерческого банка. С 24 января 1995 года — директор Ямало-Ненецкого филиала Западно-Сибирского коммерческого банка. С 19 мая 1997 года — вице-президент банка — директор Салехардского филиала ОАО «Запсибкомбанк». Закончил Тюменский государственный университет, квалификация — экономист. 29 апреля 1998 года назначен президентом ОАО «Запсибкомбанк».
13 июня 2001 года назначен вице-губернатором Тюменской области (губернатор — Сергей Собянин). В марте 2005 года назначен первым заместителем главы города Тюмени, с 21 марта исполнял обязанности главы города Тюмени. 24 ноября 2005 года утвержден президентом России Владимиром Путиным в должности губернатора Тюменской области.
2 октября 2010 года кандидатура Владимира Якушева была внесена президентом Российской Федерации в Тюменскую областную Думу для наделения его полномочиями губернатора Тюменской области. 12 октября был единогласно утвержден губернатором на следующие 5 лет. 13 мая 2014 года подал в отставку чтобы принять участие в сентябрьских выборах губернатора. Президент РФ Владимир Путин назначил его временно исполняющим обязанности губернатора. 14 сентября 2014 года победил в первом туре губернаторских выборов, набрав 87,3% голосов избирателей. В мае 2018 года был назначен министром строительства и ЖКХ в правительстве России.
9 ноября 2020 года был освобожден от занимаемой должности министра строительства и жилищно-коммунального хозяйства РФ и назначен полномочным представителем президента Российской Федерации в Уральском федеральном округе.